Mikroskopske metode u mikrobiologiji

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. Mikroskopske metode istraživanja su načina da se istražuju različite objekata uz korištenje posebne opreme. To nam omogućava da razmotre strukturu tvari i organizama, od kojih je veličina je izvan granica rezolucije ljudskog oka. U članku se daje kratak analiza mikroskopskih metoda.

pregled

используют в своей практике разные специалисты. Moderne metode mikroskopskih ispitivanja koristeći različite stručnjake u svojoj praksi. Među njima su virolozi, citologije, hematologije, morfologija, i drugi. Glavne metode mikroskopskog ispitivanja su poznati za dugo vremena. Prvi je lagani način gledanja na objektima. U posljednjih nekoliko godina, aktivno uveo u praksu, i druge tehnologije. . Tako je popularnost stekao fazne razlike, svjetlećim, smetnje, polarizacija, infracrvena, ultraljubičaste, stereoskopski metoda istraživanja. Svi oni su na osnovu različitih svojstava svjetlosti. . Pored toga, u širokoj upotrebi elektronske metode mikroskopije. Ove metode omogućuju prikaz objekata pomoću smjera tok nabijenih čestica. Treba napomenuti da ove metode studija se koriste ne samo u biologiji i medicini. в промышленности. Prilično popularan način mikroskopske studije metala i legura u industriji. Ovo omogućava studija za procjenu ponašanja spojeva za proizvodnju tehnologije kako bi se smanjila vjerojatnost loma i povećanje snage.

Light načina: karakteristike

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. Takve mikroskopske metode za proučavanje mikroorganizama i drugih objekata na osnovu različitih rezolucija opreme. Važan faktor u tom je smjeru karakteristika zraka samog objekta. Potonji, posebno, može biti transparentno i neprozirne. U skladu sa svojstvima objekta, mijenja fizikalna svojstva toka svjetlosti - osvjetljenja i boje zbog amplitude i valne duljine, avion, fazu i pravac talasa. . O korištenju ovih karakteristika i izgraditi različite mikroskopske metode.

specifičnost

Za proučavanje načina svjetlosti objekata, obično obojena. To ga čini moguće identificirati i opisati ove ili druge osobine. Potrebno je da je tkivo je fiksna, jer je bojenje otkrivaju određene strukture isključivo u ćelijama ubijen. U živim ćelijama odvojiti boju u obliku vakuole u citoplazmi. Ona ne oslikava preko strukture. Ali uz live objektima i može se ispitati pomoću svjetlosnog mikroskopa. Za tu svrhu, vitalni način učenja. U takvim slučajevima, Darkfield kondenzator. To je ugrađen u mikroskopu.

Studiranje neobojene objektima

To se vrši faznokontrasnih mikroskopom. Ova metoda se zasniva na difrakcije zraka u skladu sa karakteristikama objekta. Tokom ekspozicije označene promjene u fazi i valne duljine. U mikroskop objektiv je prisutan proziran ploča. Žive ili fiksni, ali ne obojenim predmetima zbog transparentnosti, gotovo ne mijenjaju boju, a amplituda zrak koji prolazi kroz njih, što je izazvalo samo pomak faze vala. Ali u ovom slučaju, nakon prolaska kroz objekat, svetlo fluksa skrenuta od strane ploče. Kao rezultat toga, između greda, nedostaje kroz objekat i ulazak u svijetloj podlozi, dužina talasa razlika nastaje. U određenom vrijednost vizualnog efekta javlja - u mračni predmet će biti jasno vidljivo na pozadini svjetlo, ili obrnuto (u skladu sa karakteristikama faze ploča). Da bi se dobila ta razlika treba da bude najmanje 1/4 valne duljine.

Anoptralny metoda

On je neka vrsta metoda faznokontrasnih. Anoptralny metoda uključuje upotrebu objektiv sa posebnim pločama, koji mijenjaju samo boju i jačinu od ambijentalnog svjetla. Ovo znatno proširuje mogućnosti studiranja neumrljan životnog objektima. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. Applied fazni kontrast istraživanja metoda mikroskop u mikrobiologiju, parazitologiju u studiji biljnih i životinjskih ćelija, protozoa. U metodi hematologije se koristi za izračunavanje i određivanje diferencijacije krvnih zrnaca i koštane srži.

tehnike smetnje

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Ove mikroskopske metode istraživanja generalno riješiti iste probleme kao fazni kontrast. Međutim, u drugom slučaju, stručnjaci mogu posmatrati samo konture objekata. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. Smetnje mikroskopske metode istraživanja nam omogućiti da studiraju svoj dio, provesti kvantitativne elemente procjene. To je moguće zbog razdvajanja svjetlosnog snopa. Jedan tok prolazi kroz objekat čestica, a drugi - po. U okular mikroskopa se sastaju i miješaju. Rezultirajući fazne razlike može se odrediti prema težini različitih ćelijskih struktura. Kada sekvencijalne mjerenje je sa unapred indeks refrakcije može se postaviti gusta labav tkiva i živi objekt, sadržaj proteina u njemu, koncentracija materije i vodu, i tako dalje. U skladu sa primljenim specijalisti podaci su u stanju da indirektno procijeniti membrana propusnost, aktivnost enzima, stanični metabolizam.

polarizacija

To se vrši putem Nicol prizme ili filmove polaroid. Oni su smješteni između uzorka i izvor svetlosti. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. Polarizirajući način mikroskopija istraživanja u mikrobiologiji nam omogućava da studiraju objekata nehomogene svojstva. U izotropna strukture brzina širenja svjetlosti je nezavisna od odabranih aviona. Stope anisotropic sistema varira ovisno o svjetlu orijentisan duž poprečne ili uzdužne osi objekta. Ako se prelamanja vrijednost indeksa uz strukturu biti veći nego duž poprečnih, stvara pozitivnu dvostruki lom. To je tipično za mnoge biološke objekte koji su pronašli stroge molekularne orijentacije. Svi su anisotropic. U ovoj kategoriji, naročito miofibrila, neurofibrils, cilija u prekriven cilijama epitel, kolagenih vlakana i drugi.

polarizacija vrijednost

Usporedba o prirodi zračenja i indeks prelamanja anizotropija objekta čini moguće procijeniti molekularnu strukturu organizacije. Metoda polarizacije služi kao jedna od metoda histološka analiza se koristi u citologiju i tako dalje. Ne samo obojena objekti mogu biti studirao u svjetlu. Metoda polarizacije omogućava da se ispita neumrljan i labav - Native - pripreme odjeljaka tkiva.

fluorescentne tehnike

Oni su zasnovani na svojstva određenih objekata daju sjaj u plavo-ljubičastom dio zrake spektra ili UV. Mnoge supstance kao što su proteini, neke vitamine, koenzima, droga, obdarena s primarnim (en) luminiscencije. Ostali objekti početi da sija dodavanjem Fluorohromno - posebna boja. Ovi aditivi su selektivno difuzno ili distribuira u odvojene celularne strukture ili kemijskih spojeva. Ova nekretnina je bila osnova korištenja fluorescentne mikroskopije sa histohemijskih i citološki studija.

Područja primjene

Koristeći stručnjaci imuno-fluorescentne otkriti virusnog antigena i njihovu koncentraciju prilagoditi se identificiraju virusa protiv tijela i antigena, hormoni, razni metaboličkih proizvoda i tako dalje. U tom smislu, dijagnoza herpesa, zaušnjaka, hepatitisa B, gripe i drugih infekcija pomoću fluorescentnih metode istraživanja materijala. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. Mikroskopska metoda imuno-fluorescentnim otkriva tumor malignost, odrediti ishemijske područja srca u ranim fazama od srčanog udara i tako dalje.

Korištenje ultraljubičastog

Ona se zasniva na sposobnosti brojnih supstanci u živim ćelijama ili mikroorganizmi su fiksne, ali UNCOLORED transparentan pod vidljive svetlosti tkanine upijaju UV zrake određene valne duljine. To je istina, posebno za visoko molekularne spojeve. To uključuje proteine, aromatične kiseline (methylalanine, triptofan, tirozin, itd), nukleinske kiseline i purina baze piramidinovye i tako dalje. UV mikroskopija omogućava da odredite lokaciju i broj ovih spojeva. U studiji živih bića profesionalci mogu posmatrati promjene u svojim metaboličkim procesima.

dodatno

Infracrvena mikroskopija se koristi u studiji su neprozirne da upali i ultraljubičaste zrake kroz apsorpciju objekata toka strukture čije valne duljine 750-1200 nm. Da biste se prijavili ove metode nema potrebe da se prethodno izložiti drogu kemijskih tretmana. Tipično, metoda IC se koristi u antropologiji, zoologije i drugih nauka industrije. Što se tiče medicine, ova metoda se uglavnom koristi u oftalmologiji i Neuromorphology. Studija trodimenzionalni objekti pomoću stereoskopski mikroskop. hardvera dizajn omogućava praćenje lijevo i desno oko na drugog ugla. Neprozirne objekte istražuju se na relativno niskim uvećanje (120 puta najviše). Stereoskopski metode se koriste u mikrohirurgije, Pathomorphology za sudsku medicinu.

elektronska mikroskopija

Ona se koristi za proučavanje strukture ćelija i tkiva u makromolekularna i subćelijskih nivou. Elektronska mikroskopija nam je omogućio da napravi kvalitativni skok u oblasti istraživanja. Ova metoda je naširoko koristi u biokemije, onkologije, virusologiju, morfologija, imunologije, genetike, i drugim oblastima. Značajno povećanje rezolucije koje kapaciteta protoka opremu elektrona koji prolaze kroz vakuum elektromagnetsko polje. Potonji, zauzvrat, stvoriti posebne leće. Elektroni su u stanju da prođe kroz strukturu objekta ili se odbija od njih sa odstupanja iz različitih uglova. Rezultat je prikazan na fluorescentnom ekranu uređaja. Ako prijenos mikroskopija planarne pogled dobiti prilikom skeniranja odnosno okružuju.

Preduvjeti

Važno je napomenuti da je prije dodavanje elektronske mikroskopski pregled, objekt se podvrgnuti posebnu obuku. Konkretno, upotrebu fizičke ili kemijski fiksaciju tkiva i organizama. Segmentna biopsija materijala i, osim toga, izvesti dreniranje, je ugrađen u epoksi smole, smanjiti stakla ili dijamant noževa na ultratankom sekcije. Onda je njihov kontrast i studija. Mikroskopom skeniranje ispituje površine objekata. Da biste to učinili, oni prskaju poseban supstance u vakuumsku komoru.