Ksantoproteinovaya reakcija na protein: znaci i formula jednačina

U cilju uspostavljanja kvalitativni sastav mnogim namirnicama koristi ksantoproteinovaya reakcija na protein. Prisustvo aromatičnih aminokiselina u miksu će se promijeniti u pozitivnom boji test uzorak.

Što je protein

To se naziva i proteina, što je građevinski materijal za dnevnu tijelo. Proteini održavaju mišićnu masu, vratiti oštećene i mrtve strukture tkiva različitih organa, bilo da je to za kosu, kožu i ligamenata. Uz njihovo učešće, proizvodi crvena krvna zrnca, upravlja normalan rad mnogih hormona i ćelije imunog sistema.

Ovo je složena molekula koja je polipeptid koji imaju masu veću od 6 ~ 10 ³ daltona. Strukture proteina formiranje aminokiselinskih ostataka u velikom broju, zajedno peptidnom vezom.

Strukture proteina

Karakteristično tih tvari u odnosu na niske molekularne peptidima težine je da su razvili trodimenzionalnu prostornu strukturu, uz podršku efekte sa različitim stepenom privlačnosti. Proteini imaju četiri-strukture. Za svaki od njih ima svoje karakteristike.

Kao osnovu primarne organizacije molekula izvedenih amino kiseline sekvence, struktura koja prepoznaje ksantoproteinovaya reakcija na protein. Ova struktura je periodično ponavlja peptidne veze -HN-CH-CO-, selektivni deo radikali su bočni lanci u aminokiselina. Oni definišu dalje svojstva supstance u cjelini.

Primarna struktura proteina se smatra dovoljno jaka, to je zbog prisustva jakih kovalentnih interakcija u peptidnih veza. Formiranje kasnijih nivoa javlja ovisno o atributima postavljen u početnoj fazi.

Formiranje sekundarne strukture je moguće zbog uvrtanje sekvence aminokiselina u spirali, u kojem se uspostavljaju veze vodika između skretanja.

Tercijarni organizacija nivo molekula formirana primjenom jednog od spiralne s druge fragmente sa pojavom sve moguće veze između njih, sa vodonik, disulfid, kovalentna ili jonske spoj. Rezultat je asocijacija u obliku globula.

Prostornog uređenja tercijarne strukture sa formiranjem hemijskih veza između njih dovodi do stvaranja konačnog oblika molekula ili kvartarnih nivou.

amino kiseline

Oni uzrokuju kemijska svojstva proteina. Postoji oko 20 glavnih aminokiselina koje čine polipeptida u drugom nizu. Ovo takođe se odnosi rijetki aminocarboxylic kiseline u obliku hidroksiprolina i hydroxylysine izvedene osnovne peptida.

Kao znak ksantoproteinovaya prepoznavanja proteina reakcije, prisutnost određenih aminokiselina predviđa promjena boje reagensa, što ukazuje na prisutnost specifičnih struktura u njihovom sastavu.

Kako se ispostavilo, da su karboksilne kiseline koje su se dogodile supstitucija atoma vodika na amino grupu.

Primjer struktura molekula može poslužiti strukturnu formulu glicina (HNH- HCH- COOH) kao najjednostavniji amino kiseline.

U ovom slučaju jedan od vodonika CH ₂ - može se zamijeniti ugljen više radikalan koje sadrže benzen prsten, amino, sulfo, karboksi.

Šta ksantoproteinovaya reakcija

Za kvalitativnu analizu proteina koristeći različite tehnike. To uključuje reakcije:

• Biuret sa pojavom ljubičaste boje;
• ninhidrinom da se formira plavo-ljubičastu rješenje;
• formaldehida sa uspostavljanjem crvene boje;
• Nogier ubrzava sivo-crne boje.

U obavljanju svake metode dokazali prisustvo proteina i prisustvo određenih funkcionalnih grupa u molekulu.

Postoji ksantoproteinovaya reakcija na protein. To se naziva i slom Mulder. To se odnosi na reakcije boja za proteine, u kojoj se nalaze aromatičnih i heterocikličnih aminokiselina.

Karakteristika takvog procesa uzorak nitrovanja kiselina dušične ostataka ciklički amino kiseline u posebno pristupanja nitro grupe na benzena prsten.

Rezultat ovog procesa je formiranje jedinjenja azota, koji je ubrzao. Ovo je osnovna karakteristika ksantoproteinovaya reakcije.

Ono što određuje aminokiseline

Nisu svi aminocarboxylic kiseline se mogu otkriti pomoću takav uzorak. Glavna karakteristika ksantoproteinovaya proteina reakcije detekcije - prisustvo benzena prsten ili heterociklički prsten u molekulu amino kiseline.

Jer protein je izoliran od aminocarboxylic kiseline dva aromatična, u kojem se nalazi fenil grupa (za fenilalanin), a hidroksifenil radikalni (u tirozin).

Sa ksantoproteinovaya reakcija može da se izabere heterociklički aminokiselinu triptofan, indol imaju aromatična jezgra. Prisustvo iznad spojeva u proteinu daje karakterističnu promjenu boje testno okruženje.

Kakva je korist reagensi

Za obavljanje reakcija ksantoproteinovaya je potrebno za pripremu 1% rastvor proteina jaja, ili biljnog porijekla.

Obično se koristi jaje, koja je podijeljena za daljnje odvajanje proteina iz žumance. Za 1% rastvor proteina je razrijeđen u iznosu deset puta od pročišćene vode. Nakon raspada rezultat proteina tečnost treba da se filtrira kroz nekoliko slojeva gazu. Ovo rješenje treba čuvati na hladnom mjestu.

Moguće je da izvrši reakciju s biljnih proteina. Za pripremu rješenje se koristi pšenično brašno u iznosu od 0,04 kg. 0,16 l pročišćene vode. Sastojaka su miješa u posudi koja je vezana za 24 sata na hladnom mjestu na temperaturi od oko + 1 ° C. Na kraju dana je izazvalo rješenje, a zatim filtriranjem njihovi prvi vatom, a zatim - filter papir je isključen. Rezultirajući tečnost je čuva na hladnom mjestu. Ovo rješenje je uglavnom prisutan u albumina frakcije.

Za obavljanje reakcija ksantoproteinovaya kao glavni reagens koristi dušične kiseline konc. Dalje reagensi je rješenje od 10% natrij hidroksid ili amonijak, želatinu rješenje i nekoncentrisanost fenola.

Metodologiju

U čistom cijev je napravljena od 1% proteina rješenje -ta jaja ili brašna u iznosu od 2 ml. Da bi se to se doda oko 9 kapi koncentrirane dušične kiseline u flokulacija zaustavljen. Rezultirajući smeša je grije, što je rezultiralo žutim talog postepeno nestaje i njegova boja ide u rješenje.

Kada se tečnost ohladi u epruveti uz zid dodao oko 9 kapi natrijum hidroksida, koncentriran, što je višak za taj proces. Reakcija medij postaje alkalno. Sadržaj postaje narančasta boja u epruveti.

Značajke

Od ksantoproteinovaya pod nazivom kvalitativna reakcija na dušične kiseline djelovanjem proteina, uzorak se izvodi u uključen dima haube. Obratite pažnju na sve sigurnosne mjere kada se radi sa koncentriranim kaustične tvari.

Oslobađanje sadržaja iz tube se mogu javiti tokom procesa grijanja koji se moraju uzeti u obzir pri ispravljanju u držač i odabirom nagiba.

Biranje koncentrirane dušične kiseline i kaustična soda treba samo pomoću staklenih pipeta i kruške gumene zabranjeno pipetom u usta.

Relativna reakcija s fenolom

Zbog jasnoće, procesa i potvrda prisustva fenil grupa se vrši sa sličnim uzorkom hydroxybenzene.

Cijev čineći 2 mL razrijeđene fenola, a zatim postepeno uz zid, dodan je 2 ml koncentrirane dušične kiseline. Rješenje je bio podvrgnut grijanje, čime postaje žuta. Ova reakcija je kvalitet prisustvu benzena prsten.

Proces hydroxybenzene nitro sa dušične kiseline slijedi formiranje mješavina p-nitrofenola i o-nitrofenola u procentu od 15 do 35 godina.

Test poređenja sa želatinom

Dokazati da ksantoproteinovaya reakcija na protein otkriva amino kiseline sa aromatičnim strukturom, koristite proteini koji nemaju fenolne grupe.

U čistom cijev je napravljena od 1% želatina otopine u iznosu od 2 ml. Da bi se to se doda oko 9 kapi koncentrirane dušične kiseline. Rezultirajući smjesa se zagrijava. Rješenje nije obojena u žuto, što dokazuje nedostatak aminokiselina s aromatičnim strukture. Ponekad postoji mala žutilo okoliš zbog prisustva proteina nečistoća.

kemijske jednadžbe

U dva koraka reakcije radi ksantoproteinovaya proteina. Formula prvi proces nitrovanja faza opisuje molekule aminokiselina koristeći koncentrovane dušične kiseline.

Primjer je pričvršćivanje nitro grupe na tirozin da formiraju nitrotyrosine i dinitrotirozina. U prvom slučaju na benzena prsten je priključen jedan NO ₂ -radical, a drugi spoj ima dva atoma vodonika se zamjenjuju NO _2. Hemijska formula ksantoproteinovaya tirozin reakcije predstavljeni u reakciji sa dušične kiseline da se formira nitrotyrosine molekula.

proces nitrovanja prati tranziciju bezbojna bojanje u žutom tonu. U obavljanju ove reakcije sa proteini koji sadrže amino kiseline ostataka fenilalanin ili triptofan, i boje rješenja promjena.

Drugi korak je proizvod reakcija nitriranja tirozin molekula, posebno nitrotyrosine, sa amonijum ili natrijum hidroksid. Rezultat je natrij ili amonijum soli u kojoj je boja žuto-narančaste. Takva reakcija se odnosi na mogućnost nitrotyrosine molekula kreću u quinoid obliku. Naknadno soli formirana nje NITRONIC kiseline, koja ima kinon sistem konjugovanih dvostruke veze.

Tako završava ksantoproteinovaya reakcija na proteine. Jednadžbu predstavio iznad drugom koraku.

rezultati

Prilikom analize fluida koji se nalaze u tri epruvete, referentnom se razrijediti s fenolom. Supstance sa benzena prsten dati kvalitativne reakcije sa dušične kiseline. Kao rezultat toga, ona mijenja boju rješenja.

Kao što je poznato, želatina sadrži hidrolizirani oblik kolagena. Protein ne sadrži aromatična strukturu aminokiselina. Bez promjene u boji srednje u reakciji sa kiselinom.

U epruveti treći test postoji pozitivna reakcija na proteine ksantoproteinovaya. Može se zaključiti kako slijedi: svi proteini sa aromatičnim strukturom, bilo da je fenil grupa ili indol prsten, s obzirom na promjene u boji rješenja. To je zbog formiranja nitro-jedinjenja sa žutom bojom.

Izvođenje reakcija boja dokazuje prisustvo različitih kemijskih struktura u aminokiselina i proteina. PRIMJER želatina pokazuje da njegov sastav uključuje aminocarboxylic kiseline nemaju fenil grupe ili ciklične strukture.

Sa ksantoproteinovaya reakcija može se objasniti žutilo kože kada se primjeni na to jak dušične kiseline. Iste boje će postati frothy mlijeka tokom slične analize.

U kliničkoj laboratorijskoj praksi ovaj uzorak boja se ne koristi za detekciju proteina u urinu. To je zbog žute boje samog urina.

Ksantoproteinovaya reakcija je postao sve više koristi za kvantifikaciju aminokiselina, kao što su triptofan i tirozin, kao dio različitih proteina.